今天分享一个简单，谁都可以快速设计KASP引物的工具。该工具来源于如下图的文章，具体的文章内容，大家可以自己下载查看（文章可以在NCBI上免费下载）。作者将设计工具整合到xlsx中，只需要将突变位点信息和侧翼序列填入，点击开始，就可以完成引物的设计，如下图所示。会设计3条引物：Primer_X 和 Primer_Y： 等位基因特异性引物（等位基因特异引物），每条引物均带有一段21 bp的探针结合序列。Primer_C： 通用引物序列。
这个工具的使用十分简单方便，如下图，是我设计的，将位点信息和测序序列放入对应的表格处，点击Start按钮，引物就开始设计了。设计完成后，会弹窗。大家有需要的可以下载该文章，设计工具的表格获取方法，如下图下载附件2即可使用，这些都可以免费下载使用。对于具体的设计逻辑和代码设计过程的，可以阅读原文和附件1（User Manual for EasyKASP: KASP primer design）。对于引物设计工具的开发，或许内置于excel中是一个发展趋势，更方便使用，也没有障碍。但是参数的修改和升级，可能会比命令行麻烦一点。
